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| 1. 발주 일정은 언제입니까? |
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코람바이오텍(주)의 발주 일정은 다음과 같습니다.
(주문과 견적서 요청에 관한 부분은 각 지사와 대리점으로 문의해 주십시오. 각 지사와 대리점의 연락처는 코람바이오텍 홈페이지 ⇒ 코람 지사에서 확인하실 수 있습니다.)
| 발주 일정 |
발주 |
마감 시간 |
제조사명 |
| 월 |
각 지역 지사에 문의 바람. |
오후 5:30 |
Cayman
KPL
Anaspec
SignalChem
Exiqon
B-Bridge
OriGene
Allele Biotech
Advanced ImmunoChemical Inc.
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| 화 |
발주 없음. |
| 수 |
매주 발주 |
오후 6:00 |
Cell Signaling Technology |
| 오후 5:30 |
BIONOTE |
| 목 |
매주 발주 |
오후 6:00 |
New England BioLabs(NEB) |
| 금 |
매주 발주 |
오후 5:30 |
Santa Cruz Biotechnology |
| 격주 발주 |
오후 5:30 |
ATCC |
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| 1. 제품 교환 기본 원칙은 무엇입니까? |
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코람바이오텍에서 판매되는 모든 제품에 대한 교환 권한은 해당 제품을 생산하는 미국 본사에 있습니다.
클레임 요청 시, 사용자가 작성한 Claim sheet을 근거로 하여 미국 본사의 Technical service
부서, 경우에 따라 Quality Control 부서의 담당자들이 교환 심사 작업을 하며, 심사
결과에 따라 교환 여부가 결정됩니다. |
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| 2. 각 회사별로 제품의 보증 범위는
어떻게 됩니까? |
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(1) ATCC:
ATCC에서 추천하는 배지 조성과 배양 방법을 사용했을 때, 각 세포주의 viability와
morphology의 이상에 대해서만 보증합니다, 그 외에 기증자가 언급한 각 세포주의
고유 특성에 대해서는 보증을 하지 않으며, 이 부분에 대해서는 기증자에게 직접 contact 하도록 권고합니다.
(2) 그 외의 제품들:
각 제품의 product information sheet 에 기술된 내용에 대해서만 보증을 합니다. |
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| 3. 클레임에 소요되는 시간은 어느
정도 됩니까? (최초 클레임 요청 후, 교환 승인을 받을때까지 걸리는 시간. 단, 교환 물품을
받기까지의 시간은 제외) |
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(1) ATCC:
ATCC에 claim sheet이 접수된 날로부터, 클레임 내용에 따라 2 주에서 3 주 소요됩니다.
(2) 그 외의 제품들:
각 회사의 미국 본사에 claim sheet이 접수된 날로부터, 클레임 내용에 따라 1 일에서 3 주 소요됩니다. |
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| 1. 반드시 ATCC Product
Information Sheet에 나와 있는 배지 조성을 써야 하나요? |
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ATCC Product Information Sheet에 나와 있는 배지 조성은 그 세포주를
만들어서 ATCC에 기탁한 사람이 사용했던 배지 조성입니다. ATCC는 모든 세포주를 유지하고 관리하는
것을 기본 목적으로 하는 기관이므로, ATCC에서는 특별한 사유가 있어 배지를 바꾸게 되는 경우를 제외하고는,
기증자가 사용했던 배지 조성대로 세포를 키워 분양을 하는 것을 원칙으로 하고
있습니다. 이는 [배지가 바뀌면 세포의 기본 성격도 바뀐다.]는 생각에 근거하고 있습니다.
따라서 반드시 ATCC Product Information Sheet에 있는 배지 조성을 사용해야
세포주의 변형을 막거나 늦출 수 있습니다. 즉, 사용자가 분양 받은 세포주를 ATCC에서 사용하던
배지 조성이 아닌 임의의 배지 조성에서 키울 경우, 갑작스런 배지의 변경은 세포의 viability를
낮출 수 있으며, 더 나아가 세포의 변형을 초래할 수도 있습니다. 또한 클레임 시. 다른 배지를
사용한 경우, ATCC의 교환 심사에서 불이익을 당할 수 있습니다. |
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| 2. 실제로 세포주를 받아 풀어보면,
ATCC Product Information Sheet에 언급된 viability나 세포주의 건강상태보다
다소 떨어지는데, 그 이유가 뭡니까? |
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한국에 공급되는 ATCC 세포주는 -70 도로 유지되어 미국 ATCC에서 국내로 비행기를 통해 운반되며, ATCC에서 실린 날로부터 사용자에게 전달될 때까지 약 7-8일의 시간이 걸리게 됩니다. 따라서, 실험실의 LN2 Tank(-150 도) 안에서 안정적으로 보관되었던 세포주를 풀었을때의 viability를, ATCC에서 구입한 세포주에서 똑같이 기대하기는 어렵습니다. Product Information Sheet에 언급된 viability에 대한 내용은 미국 내에서 운송되었을 때를 기준으로 합니다. 다른 국가로의 장기간 운반은 세포주에 어느 정도 영향을 줄 수 있습니다. 따라서 받으신 날짜로부터 되도록 빠른 시간 내(적어도 2 ~ 3일 내)에 cell을 키우는 것이 좋고, 세포를 풀기 직전까지는 반드시 LN2 Tank(-150 도)에 보관하여야 하며, 절대로 -70 도에 보관하면 안됩니다. 이는 세포의 viability 를 떨어뜨릴 수 있습니다. 세포를 재생시킬 때에는 반드시 ATCC에서 키운 배지와 동일한 배지 조성을 사용하셔야 세포주의 충격을 최소화할 수 있으며 viability를 최대로 끌어 올릴 수 있습니다. |
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| 3. Heat Inactivated Serum을
사용하지 말아야 하는 경우는 어떤 경우인가요? |
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한국에서 대부분의 실험자들이 cell culturen에 사용하는 serum을 <무조건 heat inactivation>을 하는데 이것은 잘못된 것입니다. Serum의 heat inactivation은 각 세포주의 viability에 영향을 미치므로, 특수한 실험적 목적을 제외(ex. signal transduction 등)하고 ATCC에서는 serum의 heat inactivation의 유무를 엄격히 구분하고 있습니다. Heat Inactivated serum을 사용해서는 안되는 cell에 사용할 경우, cell viability가 현저히 떨어질 수 있습니다(head inactivation 과정 중에 serum 안에 포함되어 있는 growth factor 들이 깨짐). ATCC product information sheet의 배지 조성 중, serum이 언급된 부분에 <heat inactivated>라는 수식어가 붙는 경우(ex. CCL-226, CRL-11506)에만 <heat inactivated serum> 사용을 권하고 있으며, 그 이외에 언급되어 있지 않으면 heat inactivation을 하지 않은 serum을 사용하셔야 합니다. 잘못된 serum을 사용해서 세포주에 문제가 생겼을 경우, 클레임 시, 교환심사에서 불이익을 당할 수 있습니다. |
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| 4. ATCC web site에서 원하는
세포주를 찾을 수가 없습니다. 방법을 알려 주세요. |
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코람바이오텍으로 연락하시면, 찾는 방법을 알려 드리거나, ATCC에서 분양하는 cell인지 확인해 드리겠습니다. |
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| 5. ATCC web site가 자꾸
에러가 납니다. 왜 그런가요? |
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ATCC는 일주일에 한번씩 미국 시간으로 일요일 오후 11시부터 월요일 새벽 4시 (한국 시간으로는 월요일)까지 web site를 업데이트합니다. 따라서 이 시간에 search 하시면 에러 메시지가 뜹니다. 이렇게 웹이 자주 업데이트되는 이유는 일주일에 수십 건씩 ATCC에 세포가 기증되고, 여러가지 이유로 단종이 되기도 하며 새롭게 세포주에 대한 정보가 바뀌기 때문입니다. |
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| 6. 관심있는 세포주의 ATCC Product
Information Sheet를 얻을 수 있나요? |
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원칙적으로 ATCC에서는 세포주를 구입하신 분에게만 ATCC Product Information Sheet을 제공합니다. 그러나 여러 사정으로 인해 ATCC 웹사이트에 제공된 정보 외에 좀 더 자세한 정보가 필요하신 분은 코람바이오텍으로 연락 주십시오. |
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| 7. 구입한 세포주의 population doubling time을 알 수 있나요? |
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Product information sheet에 이 정보가 있는 cell 도 있지만, 없는 cell도 있습니다. 없는 cell의 경우에는 ATCC에서도 측정해 보지 않았기 때문에, 이 정보를 가지고 있지 않은 경우입니다. |
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| 8. 구입할 세포주의 Passage
number를 미리 알 수 있나요? |
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ATCC에서 현재 분양하고 있는 passage number를 ATCC에 문의한 후, 알려드립니다. 코람바이오텍으로 연락 주십시오.
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| 10. ATCC 홈페이지에서 Cell 사진을 확인할 수 없는 Cell은 사진을 ATCC에 요청할 수 있나요? |
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ATCC 홈페이지 상에 Cell 사진이 없는 Cell은 ATCC에도 사진이 없는 경우이므로, ATCC로부터 사진을 받으실 수 없습니다.
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| 11. Product Information Sheet 상에 "Ampule Passage No. : Unknown"는 무슨 의미인가요? |
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ATCC 에서 분양하는 어떤 cell들의 경우에는 ampule passage number가 없는 것이 있습니다. 이런 cell들은 depositor가 ATCC에 cell을 기증할 당시에 ampule passage number를 ATCC에 제공하지 않았기 때문에, ATCC도 이 정보를 가지고 있지 않은 경우입니다.
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| 1. blocking solution의
종류가 많은데, 가장 많이 쓰는 BSA와 Skim Milk 중 어떤 것을 사용하는 것이 좋은가요?
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일반적으로 blocking solution에 많이 사용되는 BSA와 Skim Milk는 다음과
같은 성능의 차이가 있습니다. Skim Milk의 경우, blocking 효과는 뛰어나나, 일부
antibody의 antigen과의 recognition site를 masking하여, antibody의
antigen 인식을 방해하여, band의 specificity를 떨어뜨리는 경우가 더러 발생합니다.
특히 Phospho form specific antibody의 경우 이러한 일이 발생됩니다. BSA의
경우, skim milk에 비해 blocking효과는 떨어지나, 반대로 skim milk에서 나타나는
문제는 나타나지 않습니다. 그러므로 이와 같은 기본 성질을 고려해서, 알맞은 blocking solution을
선택하시면 됩니다. |
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| 2. primary antibody의
dilution은 얼마로 사용하는 것이 좋습니까? |
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각 회사에서 추천하는 primary antibody의 dilution은 대개의 경우, Product
Information Sheet에 언급이 되어 있습니다. 그러나 일부 antibody의 경우, Product
Information Sheet에 언급 되어 있지 않은 경우가 있습니다. 이 경우엔 각 회사 제품마다
Affinity의 차이 때문에 다소 희석배수가 차이 날 수도 있으나, 일반적으로 western blot은
1:200부터, IHC는 1:50부터 희석하여 사용하시고 결과에 따라 사용자가 희석 배수를 조절하시면
됩니다. |
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| 3. Secondary antibody의
dilution은 얼마로 사용하는 것이 좋습니까? |
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일반적으로 western blot의 경우 1:5000정도로 dilution하도록 권하고 있으며, 그보다 더
낮은 희석배수를 사용하게 되면, high background나 non specific bands
등의 문제점이 생길 수 있습니다. 또한 회사마다 추천하는 희석배수에 약간의 차이가 있는데, SantaCruz의
경우, 1:10,000을 권하고 있습니다. |
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| 4. Blocking peptide가
무엇인가요? |
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Blocking peptide는 control로서 이용이 가능합니다. 모든 antibody는
peptide antigen에 대해 만들어지는데, blocking peptide로 pre-adsorption을
시킨 antibody는 antigen과의 결합이 차단(blocking)되거나, Ag-Ab와의 결합과
경쟁(competition)할 수 있습니다. 원하는 antibody의 blocking이나 competition을
위해, antibody의 적절한 농도보다 5배가 높은 blocking peptide와 섞어 PBS로
최종 volume을 500 ul로 맞춘 후, RT에서 2시간 이상 혹은 4도에서 overnight
incubation을 합니다. 이 mixture를 적절한 blocking buffer에 희석하고
원하는 실험방법에 적용하면 됩니다. |
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5. 해당 antibody의 recognition
site에 대한 자세한 정보를 알고 싶습니다.
알 수 있나요? |
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물론 예외적인 경우도 더러 있지만, 대부분의 antibody 회사는 antibody의 recognition
site에 대해 sequence까지 자세히 공개를 하지 않습니다. 그 이유는 antibody를 만들
때 사용되는 peptide antigen에 대한 정보가 결국에는 해당 antibody를 만드는 중요한
기밀 사항이 되기 때문입니다. 따라서 이런 경우에는 각 antibody 회사의 Technical
Service에서는 사용자가 실험 목적을 밝히고 <어떤 단백질의 어떤 부분을 detection하고자
하는데, 이 antibody가 적합한가?> 정도의 질문에 Yes/No로 대답하고 있습니다.
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| 6. Western blot 시, 해당
antibody의 Positive control cell lysate를 찾고 있는데 찾을 수가 없습니다.
도와주실 수 있나요? |
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Positive control cell lysate는 catalog나 각 회사의 웹사이트에 공개가
되어 있으나, 찾으시기가 어려우시거나, 찾아도 나와 있지 않은 경우에는 코람바이오텍으로 연락 주십시오.
도와드리겠습니다. |
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| 7. SantaCruz에서 EMSA
용으로 나온 antibody는 일반 antibody와 어떻게 차이가 납니까? |
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주로 SantaCruz는 EMSA용 antibody도 함께 판매를 하고 있습니다. Catalog
# 뒤에 <-X>라고 붙은 제품들이 바로 EMSA 용 antibody 입니다. 차이점은
일반 antibody보다 10배 농축이 되어 있으며, 일반 antibody solution 안에
첨가되어 있는 gelatin이 빠져 있습니다. 따라서 작은 volume으로 EMSA에 필요한 reaction을
하기에 적합하도록 나와있습니다. 또한 일반 antibody는 너무 묽어 EMSA를 할 수 없지만,
EMSA 용 antibody는 희석배수는 높여 western blot에도 사용할 수 있습니다. |
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| 8. Molecular size를 찾을
수 없습니다. 알려주세요. |
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일반적으로 대부분 catalog나 Product information sheet 혹은 각 회사의
웹사이트에 제공이 되나, 찾으시기가 어려우시거나, 찾아도 나와 있지 않은 경우에는 코람바이오텍으로 연락
주십시오. |
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| 9. 살아있는 세포에 직접 처리할 수
있는 sodium azide free antibody가 있나요? |
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일반적으로 대부분의 antibody solution에는 sodium azide가 소량 첨가되어
있습니다. 따라서 일반 antibody를 살아있는 세포에 직접 처리하게 되면 sodium azide
effect가 생길 수 있습니다. 따라서 SantaCruz에서는 제품에 따라 sodium azide
free antibody가 판매됩니다. 특정 단백질의 functional blocking 등의 목적으로
세포에 직접 antibody를 처리할 때 사용하시면 됩니다. |
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| 10. 일반 secondary antibody와
pre-adsorbed secondary antibody의 차이점은 무엇입니까? |
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pre-adsorbed secondary antibody는 immunoglobulin이 풍부한
조직이나 세포의 western blot을 시행할 때, 사용되는 secondary antibody로서,
일반 secondary antibody에 human IgG나 mouse IgG가 pre-adsorption
된 상태입니다. |
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| 11. 해당 antibody의 Product
Information Sheet나 manual을 얻을 수 있나요? |
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일반적으로 대부분 catalog나 Product information sheet 혹은 각 회사의
웹사이트에 제공이 되나, 찾으시기가 어려우시거나, 찾아도 나와 있지 않은 경우에는 코람바이오텍으로 연락
주십시오. |
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| 12. SantaCruz에서 판매하는 siRNA sequence를 알 수 있나요? |
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SantaCruz는 siRNA 제품을 구입한 사용자에 한해서, End-user와 구입 내역을 확인 후, siRNA sequence를 공개합니다, 즉, 구입 전에 미리 알 수 없습니다. siRNA 제품을 구입하신 후, 코람바이오텍으로 연락 주시면, SantaCruz 본사로 자료 요청 후, 알려드리겠습니다. |
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